162
1. Plazmidani kichik hajmi. Ekzogen DNKni
E.coliga
o‘ti
shining
samaradorligi, plazmidani kattaligi 15 m.j.n.dan. ko‘p bo‘lsa pasa
yadi.
2. Plazmidada unikal restriktsiya sayti mavjud bo‘li
shi kerak, unga
donor DNKsini o‘tkazish mumkin.
3.
Rekornbinant
DNK
tutuvchi
retsipiyent
hujayralarning
identifikatsiyalash uchun plazmidada bir va undan ortiq selektiv genetik
markerlar mavjud bo‘li
shi kerak.
Yuqorida keltirilgan xususiyat
larga ega bo‘lgan plazmida vektorlari gen
injenerligi yo‘li bilan
yaratiladi.
Plazmidlarning molekulalari ma’lum modifikatsiya qilingandan so‘ng,
vektor sifatida foydalaniladi. Avval uni halqa holatiga to‘g‘ri yo‘naltirilgan
restriktazalar orqali keltiriladi. Hosil bo'lgan DNKning oxiri to‘mtoq holda
bo'ladi. Tekis plazmidali DNK to‘mtoq tomoni oxirida maxsus
oligonukleotidlar hosil qilinadi, ulami linkyorlar yoki yopishqoq tomonli
linkyorlarga fermentlar yordamida DNK bog'lanadi.
Hosil qilingan vektor va unga bog‘langan kDNK hujayra genomiga
kirgiziladi.
Kirgizilgan
begona
DNK
hujayra
genomini
o'zgartirib,
transformirlangan holatga keltiradi.
Bu hujayralar maqsadga asosan
seleksiyalanishi yoki klonlanishi mumkin. Hozirgi kunda vektorlaming ikki
xili ma’lum bo'lib, ular oddiy va maxsus turlarga bo‘linadi. Oddiy velctorlar
klonlanganda ko‘p miqdordagi genlardir, maqsadlilarini ajratib, genlar
“kutubxonasi” ni
yaratish mumkin.
Maxsus vektorlar esa genlarning ekspressiyas
iga aloqador bo‘ladi.
Oddiy vektorlar har xil hujayralardagi genlarni ajratish va ularni
o‘rganish
uchun ishlatilsa, maxsus vektorlar biotexnologiya maqsadlarda, genlarning
ekspressiyas
ini va maqsadli mahsulotlami ko‘p
miqdorda sintezlashda
qo'llanadi. Aynan shu maqsadda maqsadli oqsilni sintezlovchi genni hujayra
xromosomasiga joylab, promotor bilan bo
g‘
lanadi.